-
Публикаций
16 -
Зарегистрирован
-
Посещение
-
Победитель дней
1
Сообщения, опубликованные Papa Justify
-
-
Сухая питательная питательная среда сабуро состоит из нескольких компонетов(пептон сухой ферментированный,глюкоза,агар микробиологичекий) и предназначена для культивации грибов и грибоподобных организмов. Если заваривать её по прилагаемой инструкции, то получится однородная студенистая масса с легким карамельным оттенком и идеально подходит для роста грибов. Также с помощью этой смеси можно приготовить питательный раствор, который впоследствии использовать при приготовлении споровой взвеси. Путем опытных вычислений было найдено соотношение раствора как 0,25 гр сухой среды сабуро к 150 мл кипяченой воды. Для приготовления понадобится емкость для варки раствора, это небольшой ковшик или лабалаторный стакан, ватный диск, спиртовка, нужное количество шприцов (до 15 по 10мл),стеклянную чистую и стерилизованную емкость с герметичной крышкой на остаток раствора (если останется). На зажженную спиртовку ставим емкость для варки с 250 мл отфильтрованной воды и кипятим пока не выпариться примерно 100 мл. Потом уменьшаем огонь горелки, добавляем порошок сабуро и варим при небольшом кипении ещё 2 минуты,постоянно помешивая. Затем выбираем через ватный диск ещё кипящий раствор в шприц. Повторяем процедуру если шприц не один. Если раствор остался, то его нужно отфильтровать в заранее приготовленную стеклянную емкость и закрыть плотно крышкой, и затем стерилизовать на пару 20 минут. Когда раствор в шприцах и емкости остынет он готов для приготовления споровой взвеси. Впоследствии, для быстрого прорастания спор взвесь следует держать при комнатной температуре.
Замечания:
Все операции проводить в условиях повышенной саннитарии!
Перед инокуляцией добавить во взвесь антибиотика!
Сухая смесь сабуро ОЧЕНЬ ГИГРОСКОПИЧНА! хранить в сухом месте, без перепадов температур! работать с порошком только сухими иструментами и не держать емкость с порошком долго открытой.Преимущества метода. Взвесь на растворе сабуро показала отличные результаты по скорости распускаемости спор! растпустившиеся споры прорастают на основном субстрате через 1-3 дня (см. фото). Раствор прост в приготовлении! Раствор идеально подходит для дальнейшего выращивания жидкого мицелия.
Недостатки метода. Порошок сабуро достаточно дорогой и редкий, который продают крупными партиями. (Минимум что мне удавалось купить это 250 гр.) Высокая гигроскопичность порошка. Повышенные требования
к санитарии помещения.Двухгодичный P.C. McKennai через 8 часов в растворе сабуро.
Он же через сутки
P. Tampnensis через сутки
P. Tampnensis на третий день на основном субстрате (овёс+сфагнум)
P.C. Escondido через 5 дней
- 2
Клонирование мицелия из склероции P.Galindoi на питательной среде сабуро.
в FAQ Руководства и пособия по культивации.грибов,сборке парников,инкубаторов,главбоксов и много полезной информации внутри форума
Опубликовано
Сухая питательная питательная среда сабуро состоит из нескольких компонетов(пептон сухой ферментированный,глюкоза,агар микробиологичекий)
и предназначена для культивации грибов и грибоподобных организмов. Если заваривать её по прилагаемой инструкции, то получится однородно студенистая масса
с легким карамельным оттенком и идеально подходит для роста грибов. В данном случае это будет клонирование мицелия из склероции.
Для этого понадобится: сухая питательная среда сабуро из расчета 6гр порошка на 100мл воды,спиртовая горелка, емкость для варки (лабалаторный стакан и маленький ковшик),фильтрованная вода, чашки Петри,ватный диск или иной фильтр,скалпель или острый канцелярский нож, дезинфицирующее средство, перекись водорода 3%, небольшая склероция P.Galindoi.
Все манипуляции производятся в пространстве с повышенными санитарными требованиями!
Налить в емкость для варки 200 мл воды, поставить на горелку и кипятить 10-15 минут. Если воды после кипячения осталось больше 100мл, то лишнюю воду следует слить. Добавить в раствор 6 гр сухой смеси сабуро и перемешать до полного растворения.Варить при слабом кипении еще 2 минуты. Полученную жидкость отфильтровать и разлить по чашкам Петри. В моем случае это невысокие банки.
Слой среды должен быть полсантиметра в идеале.( я налил около сантиметра). Чашки Петри стерилизуем на пару 15 минут и посушиваем открытые чашки под бактерицидной лампой, чтобы не было капель конденсата.
Далее,при соблюдении санитарных норм работы с генматериалом грибов, применении защиты (перчатки маска) и дезсредств, чистим подопытную склероцию от верхнего слоя,попросту срезая его. Затем вырезаем образцы, в данном случае три неровных прямоугольника
и кладем их в центр поверхности питательной среды. Закрываем чашки Петри. Рост мицелия происходит при температуре 23-28 градусов. В данном случае клонированный мицелий захватил всю поверхность среды в течении месяца.
Полученный клон был высажен на субстрат из овса. Полностью колонизировал субстрат примерно за 25-30 дней и был оставлен на получение склероций на 3 месяца. Урожай на фото ниже