Изготовление стерильного спорового отпечатка

grofandme · 21 января, 2014

Данный материал я взял с сайта shroomery.org, перевёл его, немного сократив описание, ибо в оригинале было много "воды", и дополнил некоторыми своими соображениями. Надеюсь, эта инструкция поможет многим начинающим микологам избежать ошибок при изготовлении споровых отпечатков!

=======================================================

Описанная ниже технология не является инновационной, большинство идей были позаимствованы мною у других микологов. Причина, по которой я немного усовершенствовал обычную методику, заключается в том, что я хочу на 100% быть уверенным в стерильности фольги, на которую наносится отпечаток. Используя другие методы я обнаружил, что добиться абсолютной стерильности непросто, особенно когда изготавливаешь крупные отпечатки.

Для изготовления стерильного отпечатка потребуется:

1) Глав - бокс (его наличие желательно, но не обязательно. Можно готовить отпечаток в стерильном помещении или на дверце включенной духовки).

2) Фольга (чем тоньше, тем лучше).

3) Стеклянная банка

4) Ножницы

5) Бумажные салфетки

6) Стакан/рюмка/стеклянная банка/чашка петри

7) Канцелярская скрепка/вилка/нож/тонкий гвоздь

8) Спирт/другой антисептик

9) Пищевой контейнер

10) Зип – лок пакетик

...И конечно же спороносный гриб! [mush2]

!	Прежде чем начать действовать, убедитесь, что перед каждым этапом работы вы обеззаразили рабочее место (помещение и поверхности), а ваши руки обработаны спиртом/другим антисептиком!!!

Шаг №1. Подготовка фольги

1) Отрежьте квадратные куски фольги, сторона должна быть равна примерно 8-10 см. На каждый принт понадобится 2 куска фольги.

2) Поместите куски фольги в банку. Затем сделайте крышку для банки, тоже из фольги. Просто отрежьте прямоугольный кусок фольги, сложите его вдвое и накройте им банку хорошенько прижав по бокам. Отправьте банку в духовку на 1 час (250 градусов) или стерилизуйте 1 час в кастрюле/скороварке.

Шаг №2. Выбор спороносного гриба

Выберите крупный гриб, шляпка которого раскрылась, а споры уже обсыпали вуаль (если споры чёрные, вуаль соответственно тоже будет чёрной).

Шаг №3. Изготовление отпечатка

Перед тем, как приступить к этому этапу, на вашем рабочем месте должны

находиться:

• Пищевой контейнер

• Спирт/другой антисептик

• Бумажные салфетки

• Ножницы/скальпель/нож

• Стакан/рюмка/стеклянная банка/чашка Петри

• Спороносный гриб

1) Как только банка со стерилизованной фольгой полностью остыла, протрите спиртом пищевой контейнер, убедитесь, что он высох. Затем положите на дно контейнера несколько салфеток, которые буду служить подложкой для фольги. Подложек понадобится столько, сколько отпечатков вы планируете изготовить. Рядом поставьте банку с фольгой.

2) С помощью стерильных ножниц или ножа или скальпеля отделите шляпку от ножки. В идеале должно получиться так, чтобы впоследствии шляпка лежала на фольге ровно. Положите шляпку на стерильную поверхность.

3) Достаньте необходимое количество фольги (только половину, вторая часть фольги понадобится позже. То есть, если вы изготавливаете 2 отпечатка, на данном этапе достаньте 2 куска фольги, а 2 оставьте в банке) и поместите на салфетки. Накройте фольгу стерильным стаканом/рюмкой/стеклянной банкой/чашкой Петри (в зависимости от размера шляпки).

4) Подождите 2 минуты (чтобы фольга приняла нужную форму), снимите ёмкость с фольги и положите шляпку на фольгу, а затем накройте шляпку стаканом/рюмкой/стеклянной банкой/чашкой Петри так, чтобы шляпка полностью оказалось внутри ёмкости.

5) Поместите контейнер в сухое место. Убедитесь, что ваша девушка, ребенок, кошка не смогут добраться до контейнера!

По истечении 24 – 36 часов, вы можете приступать к следующему этапу.

Шаг №4. Сушка отпечатка

По прошествии 24 – 36 часов, обеззаразьте рабочее место, подготовив стерильную развёрнутую канцелярскую скрепку/вилку/нож/тонкий гвоздь.

1) Снимите ёмкость, которой вы накрывали шляпку. Не убирайте её далеко, а протрите спиртом и поставьте рядом.

2) С помощью стерильной канцелярской скрепки/вилки/ножа/тонкого гвоздя проколите шляпку посредине (но так, чтобы не коснуться фольги под ней) и отложите шляпку в сторону.

3) Накройте отпечаток стаканом/чашкой Петри, или что вы там использовали, и снова поставьте пищевой контейнер в сухое место.

4) Отправьте шляпки на сушку, они всё ещё содержат псилоцибин.

По истечении 24 часов, отпечаток должен высохнуть, а вы сможете приступить к последнему этапу.

Шаг №5. Получение стерильного отпечатка

Обеззаразьте рабочие поверхности и подготовьте следующие инструменты:

• Банка со стерилизованной фольгой

• Ножницы (протрите спиртом)

• Нож с прямым лезвием (протрите спиртом)

• Спирт/другой антисептик

• Зип – лок пакетики (протрите спиртом изнутри, пусть высохнут)

• Маркер

1) Протрите руки антисептиком, а затем снимите ёмкости с ваших отпечатков.

2) Отрежьте края фольги вокруг отпечатка, так чтобы от края до отпечатка оставалось не более 1 см.

3) Достаньте кусок фольги из банки, с помощью ножа загните один край на 1 см.

4) Возьмите кусок фольги с отпечатком и положите его отпечатком вниз на второй кусок фольги так, чтобы одна сторона фольги с отпечатком оказалась внутри загнутой стороны второго куска. Держа фольгу за загнутый край, обрежьте большой кусок фольги по оставшимся 3-м краям так, чтобы до фольги с отпечатком оставалось расстояние в 1 см.

5) С помощью ножа загните оставшиеся 3 края поверх фольги с отпечатком.

6) Используя маркер подпишите название стрейна с той стороны, где не видно загнутых краёв.

7) Поместите полученный «конверт» в стерильный зип – лок пакетик.

ПРИМЕЧАНИЕ:

• Отпечаток следует хранить в сухом, холодном, тёмном месте. Можно поместить отпечаток в тёмную ёмкость и отправить на хранение в холодильник.

• Одним споровым отпечатком размером 1см х 1см можно заправить 1 инокуляционный шприц ёмкость 5 мл.